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水生生物毒性試驗(yàn):共性問(wèn)題(三)


1、阿維菌素B2中, B2a和B2b兩個(gè)組分濃度相差很大,高濃度組兩個(gè)組分均可檢出,低濃度組僅能檢出其中一個(gè)組分,類似情況如何處理?低濃度處理組的濃度能否表示為“檢出組分濃度+未檢出組分的儀器檢出限”?

答:同一有效成分的兩個(gè)組分降解、吸附等特性相似時(shí),如此例中,可根據(jù)其中一個(gè)組分的實(shí)測(cè)濃度及供試物中兩個(gè)組分的比例,推算另一個(gè)組分的濃度并計(jì)算總濃度。其余情況,對(duì)于低濃度組中未檢出的組分,在分析方法正確、有效且試驗(yàn)過(guò)程中進(jìn)行了供試物濃度檢測(cè)的前提下,可使用供試物的檢測(cè)限作為終濃度;對(duì)于檢出供試物但不能定量的,可用分析方法定量限的1/2作為終濃度。


2、對(duì)于混配制劑,其中一個(gè)有效成分可減免濃度檢測(cè)時(shí),如何計(jì)算LC50或EC50,減免濃度檢測(cè)的組分能否使用理論濃度計(jì)算?

答:分別給出以可檢測(cè)成分濃度計(jì)和以“B濃度+A理論濃度”計(jì)的結(jié)果。


3、難溶性原藥配制試驗(yàn)液時(shí),如需使用助溶劑,對(duì)助溶劑種類有何要求?用量是否必須≤0.1g(mL)/L?在溶劑對(duì)照組受試生物表現(xiàn)正常的前提下能否大幅增加助溶劑用量?

答:試驗(yàn)液配制過(guò)程中應(yīng)盡量避免和減少助溶劑的使用。確需使用時(shí),應(yīng)滿足以下條件:①只能使用低毒助溶劑,如丙酮、乙醇、甲醇、叔丁醇、乙腈、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜和三甘醇等;②助溶劑含量應(yīng)≤100 mg/L或 0.1 mL/L,且各個(gè)處理組及溶劑對(duì)照組中助溶劑的含量應(yīng)一致;③采用助溶劑助溶時(shí),助溶劑用量不應(yīng)超出準(zhǔn)則要求。


4、對(duì)于手性化合物、同分異構(gòu)化合物,測(cè)定時(shí)應(yīng)先將峰面積加和再計(jì)算濃度,還是先根據(jù)峰面積分別計(jì)算濃度再求和?

答:取決于供試物的標(biāo)稱濃度(以異構(gòu)體形式計(jì)還是以總量計(jì))和標(biāo)樣;如有多個(gè)峰,可將峰面積加和再計(jì)算濃度。


5、化學(xué)分析過(guò)程中,水樣的稀釋算不算前處理方法(如果水樣稀釋了,是否需要設(shè)置同樣稀釋倍數(shù)的添加回收濃度)?添加回收濃度的設(shè)置有何要求?

答:添加回收樣品的處理方式與樣品前處理方式應(yīng)一致(前處理后進(jìn)樣前用流動(dòng)相稀釋的除外);添加回收濃度應(yīng)涵蓋試驗(yàn)的最低和最高濃度。


6、哪些生物化學(xué)農(nóng)藥和植物源農(nóng)藥可以減免試驗(yàn)液中供試物濃度檢測(cè)?

答:原則上均應(yīng)測(cè)定真實(shí)濃度,需采用特殊分析方法的個(gè)別產(chǎn)品可申請(qǐng)減免。


7、對(duì)于無(wú)機(jī)銅供試物(如氫氧化銅),試驗(yàn)液可否不進(jìn)行濃度測(cè)定?

答:考慮到無(wú)機(jī)銅供試物的穩(wěn)定性,試驗(yàn)中可以不進(jìn)行濃度測(cè)定。


8、對(duì)于含有微生物成分的復(fù)配制劑,應(yīng)依據(jù)化學(xué)農(nóng)藥還是微生物農(nóng)藥準(zhǔn)則進(jìn)行試驗(yàn)?

答:微生物農(nóng)藥為新有效成分的,需用該有效成分的母藥采用微生物試驗(yàn)準(zhǔn)則單獨(dú)進(jìn)行試驗(yàn);制劑按化學(xué)農(nóng)藥測(cè)試方法進(jìn)行測(cè)試。


9、微生物農(nóng)藥試驗(yàn)周期較長(zhǎng),選擇接觸式暴露途徑進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)是否要對(duì)水體進(jìn)行曝氣處理,或者更換試驗(yàn)溶液?

答:可以采用半靜態(tài)法,也可以對(duì)試驗(yàn)液進(jìn)行曝氣處理。


10、微生物農(nóng)藥試驗(yàn)中,致死毒性和致病毒性兩者選其一計(jì)算LC50,還是均需計(jì)算?

答:根據(jù)NY/T 3152《微生物農(nóng)藥環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則》的規(guī)定,當(dāng)最大劑量試驗(yàn)表明死亡(病變)率>50%時(shí),應(yīng)進(jìn)行劑量效應(yīng)試驗(yàn)和致病性試驗(yàn)。劑量效應(yīng)試驗(yàn)的目的是獲得LC50,致病性試驗(yàn)無(wú)法計(jì)算LC50,其目的是為證實(shí)菌株對(duì)受試生物的致病能力。


11、對(duì)于水中溶解性較差的原藥,如何增大其在試驗(yàn)液中的溶解度?

答:當(dāng)采用直接添加供試物法配制試驗(yàn)液時(shí),可通過(guò)增長(zhǎng)攪拌時(shí)間、增大攪拌速度、超聲波助溶,以及在條件允許情況下適當(dāng)升高溫度等方法增大供試物在試驗(yàn)液中的溶解。還可采用溶劑助溶法,通過(guò)選擇合適的、低毒的有機(jī)溶劑、分散劑(如吐溫)等助溶,在配制貯備液或試驗(yàn)液過(guò)程中加入少許有機(jī)溶劑、分散劑等。
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